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基因芯片的測序原理

       基因芯片又稱為DNA微陣列(DNA microarray),可分為三種主要類型:

       1)固定在聚合物基片(尼龍膜,硝酸纖維膜等)表面上的核酸探針或cDNA片段,通常用同位素標(biāo)記的靶基因與其雜交,通過放射顯影技術(shù)進(jìn)行檢測。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是所需檢測設(shè)備與目前分子生物學(xué)所用的放射顯影技術(shù)相一致,相對比較成熟。但芯片上探針密度不高,樣品和試劑的需求量大,定量檢測存在較多問題 。

       2)用點(diǎn)樣法固定在玻璃板上的DNA探針陣列,通過與熒光標(biāo)記的靶基因雜交進(jìn)行檢測。這種方法點(diǎn)陣密度可有較大的提高,各個探針在表面上的結(jié)合量也比較一致,但在標(biāo)準(zhǔn)化和批量化生產(chǎn)方面仍有不易克服的困難。

       3)在玻璃等硬質(zhì)表面上直接合成的寡核苷酸探針陣列,與熒光標(biāo)記的靶基因雜交進(jìn)行檢測。該方法把微電子光刻技術(shù)與DNA化學(xué)合成技術(shù)相結(jié)合,可以使基因芯片的探針密度大大提高,減少試劑的用量,實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化和批量化大規(guī)模生產(chǎn),有著十分重要的發(fā)展?jié)摿Α?/span>

       它是在基因探針的基礎(chǔ)上研制出的,所謂基因探針只是一段人工合成的堿基序列,在探針上連接一些基因芯片可檢測的物質(zhì),根據(jù)堿基互補(bǔ)的原理,利用基因探針到基因混合物中識別特定基因。它將大量探針分子固定于支持物上,然后與標(biāo)記的樣品進(jìn)行雜交,通過檢測雜交信號的強(qiáng)度及分布來進(jìn)行分析?;蛐酒ㄟ^應(yīng)用平面微細(xì)加工技術(shù)和超分子自組裝技術(shù),把大量分子檢測單元集成在一個微小的固體基片表面,可同時對大量的核酸和蛋白質(zhì)等生物分子實現(xiàn)高效、快速、低成本的檢測和分析。由于尚未形成主流技術(shù),生物芯片的形式非常多,以基質(zhì)材料分,有尼龍膜、玻璃片、塑料、硅膠晶片、微型磁珠等;以所檢測的生物信號種類分,有核酸、蛋白質(zhì)、生物組織碎片甚至完整的活細(xì)胞;按工作原理分類,有雜交型、合成型、連接型、親和識別型等。由于生物芯片概念是隨著人類基因組的發(fā)展一起建立起來的,所以至今為止生物信號平行分析最成功的形式是以一種尼龍膜為基質(zhì)的“cDNA陣列”,用于檢測生物樣品中基因表達(dá)譜的改變。


標(biāo)簽:  基因芯片 測序原理 基因芯片的測序
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