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微流控芯片在ctDNA和CTC中的應(yīng)用

相比傳統(tǒng)腫瘤手術(shù)、創(chuàng)傷的檢測方式,液態(tài)活檢無創(chuàng)便捷,并且可以實時進(jìn)行監(jiān)測,使其成為國際研究領(lǐng)域及臨床領(lǐng)域關(guān)注的重點。如今發(fā)展較為成熟的技術(shù)是ctDNA和CTC。


ctDNA:


ctDNA是腫瘤患者血液中游離的來自腫瘤的DNA(circulating tumor DNA,ctDNA),因為基于ctDNA檢測的液態(tài)活檢進(jìn)入MIT評選的2015年十大突破技術(shù),因而廣受關(guān)注。


ctDNA常用數(shù)字PCR進(jìn)行研究,其對微量DNA的檢測,包括微量的突變有廣泛的應(yīng)用前景,是目前發(fā)展的一個重要方向。如今數(shù)字PCR可以分為兩類,一個液滴類的數(shù)字PCR,還有一個是微流控數(shù)字PCR。


微流控芯片數(shù)字PCR采用微流控芯片,將PCR反應(yīng)液分割成數(shù)量眾多且體積相等的反應(yīng)單元,通過檢測擴(kuò)增后熒光信號呈陽性的反應(yīng)單元的數(shù)量對核酸模板進(jìn)行定量,具有可絕對定量、靈敏度高等優(yōu)點。在感染性疾病診斷、腫瘤早期診斷、產(chǎn)前診斷等多個領(lǐng)域顯示出巨大的應(yīng)用前景。


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數(shù)字PCR ctDNA檢測的應(yīng)用主要是檢測稀有突變和拷貝數(shù)變異分析,在基因表達(dá)分析以及甲基化位點分析可以準(zhǔn)備實現(xiàn)。其對用量使用,試劑的使用,分析,后期非常好的操作性和便捷性。但在通量性等方面還需要繼續(xù)提升。


CTC:


循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC,CirculatingTumorCell)是存在于外周血中的各類腫瘤細(xì)胞的統(tǒng)稱,因自發(fā)或診療操作從實體腫瘤病灶(原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶)脫落,大部分CTC在進(jìn)入外周血后發(fā)生凋亡或被吞噬,少數(shù)能夠逃逸并錨著發(fā)展成為轉(zhuǎn)移灶,增加惡性腫瘤患者死亡風(fēng)險。CTC檢測通過捕捉檢測外周血中痕量存在的CTC,監(jiān)測CTC類型和數(shù)量變化的趨勢,以便實時監(jiān)測腫瘤動態(tài)、評估治療效果,實現(xiàn)實時個體治療。


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循環(huán)腫瘤CTC相比ctDNA有自己的優(yōu)勢,微流控在該領(lǐng)域也有非常重要的作用,由于微流控芯片管道尺寸在微米量級和細(xì)胞尺寸匹配,非常適合應(yīng)用于細(xì)胞分選,近些年來,有越來越多的研究者將該技術(shù)應(yīng)用在CTCs的分選上。大家都知道,CTC在血液中非常稀少,如何實現(xiàn)CTC的捕獲是關(guān)鍵。如今CTC捕獲有三個關(guān)鍵技術(shù)瓶頸需要突破。


1、有效提高捕獲率;

2、實現(xiàn)較高細(xì)胞純度,保持完整細(xì)胞活性。

3、提升通量,包括樣本數(shù)量處理能力和樣本體積的處理能力。


標(biāo)簽:   微流控芯片 液態(tài)活檢 CTC
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