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利用微流控芯片可實(shí)現(xiàn)多重尿路感染病原鑒定與抗生素感性測試

 微流控芯片

  尿路感染是非常常見的感染性疾病,多由細(xì)菌引起。臨床治療尿路感染病例時(shí),醫(yī)生需要了解病原菌的種類、數(shù)量以及對于抗生素的敏感性,以便進(jìn)行針對性治療。因此,臨床上的細(xì)菌檢測平臺,需要具備多重病原菌快速定性與定量分析以及抗生素敏感性測試的功能。

 

 傳統(tǒng)的尿路感染病原菌鑒定及抗生素敏感性試驗(yàn)主要采用平板培養(yǎng)法,但是耗時(shí)較長,不利于及時(shí)診斷和抗生素選擇指導(dǎo)。近年開發(fā)出了尿路感染病原菌檢測新方法,如免疫熒光法、干化學(xué)分析法、流式細(xì)胞法、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、質(zhì)譜法及新一代測序技術(shù)等,雖然可以顯著縮短檢測時(shí)間,但這些方法大多依賴于大型或者精密設(shè)備,難以在基層醫(yī)療單位推廣。因此,急需簡便、快速的尿路感染病原菌檢測方法。

 

 近年發(fā)展起來的微流控芯片細(xì)菌分析技術(shù)較之傳統(tǒng)方法具有很多優(yōu)勢。首先,芯片細(xì)菌分析平臺小巧便攜,操作簡便,非常適用于現(xiàn)場快速檢測;其次,芯片微分析平臺有利于提高測試通量和降低試樣消耗量,便于實(shí)現(xiàn)高通量分析;此外,大多數(shù)芯片細(xì)菌分析方法可以免去預(yù)增菌步驟,因而可以顯著縮短分析時(shí)間。因此,微流控芯片技術(shù)為細(xì)菌分析提供了一種理想的解決方案。然而,目前報(bào)道的微流控芯片細(xì)菌分析大多只針對單一種類細(xì)菌檢測,無法滿足臨床上對病原菌的分析需求。

 

 研究人員研發(fā)出了一種微流控芯片紙基細(xì)菌分析方法,在芯片培養(yǎng)池中以濾紙作為襯底組合固定菌種特異性顯色培養(yǎng)基和抗生素。濾紙成分為纖維素,具有疏松多孔結(jié)構(gòu),不僅具有良好的生物相容性,而且易于固定試劑,借助芯片集成PVDF疏水薄膜止流閥,引入芯片的尿液樣品被分隔于不同培養(yǎng)池,以實(shí)現(xiàn)多重顯色反應(yīng)。根據(jù)特異性顯色結(jié)果實(shí)現(xiàn)細(xì)菌定性鑒定,通過實(shí)時(shí)顯色強(qiáng)度分析實(shí)現(xiàn)細(xì)菌定量測定,依據(jù)抑制顯色反應(yīng)的最低抗生素濃度確定抗生素敏感性,因此在芯片上實(shí)現(xiàn)了多重細(xì)菌的同時(shí)定性與定量分析和AST。

 

 此次研發(fā)出的微流控芯片多重細(xì)菌鑒定和AST方法,具有操作簡單、耗時(shí)短、低消耗和高通量的優(yōu)勢,適用于醫(yī)療資源匱乏條件下的細(xì)菌分析。



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