人類乳頭瘤病毒（HPV）是宮頸癌和其他肛門生殖器官癌癥的病因。HPV的篩查，特別是高危型HPV的檢測，是宮頸癌發(fā)病率和死亡率大幅下降的原因。HPV檢測迫切需要快速、準(zhǔn)確、經(jīng)濟(jì)、高通量的方法。其中基于微流控的核酸檢測技術(shù)已經(jīng)成為一種有吸引力的即時(shí)診斷工具。然而，由于樣品制備復(fù)雜、耗時(shí)，大多數(shù)微流控核酸檢測過程中不包含核酸提取過程，限制了其臨床廣泛應(yīng)用。近日，清華大學(xué)深圳國際生物制造工程實(shí)驗(yàn)室Shengli Mi和Jiajun Huang領(lǐng)導(dǎo)的課題組研發(fā)了一種集核酸純化、等溫?cái)U(kuò)增和實(shí)時(shí)熒光檢測于一體的微流控系統(tǒng)用于高危型HPV的診斷。相關(guān)論文發(fā)表于Analyst雜志上。

在本文中，研究人員在設(shè)計(jì)離心式微流控時(shí)增加了核酸純化的步伐，利用Chelex-100樹脂顆粒吸附樣本匯總的雜質(zhì)和擴(kuò)增抑制劑，通過離心將顆粒大于微流控管道的Chelex-100分離。通過綜合評估，這是一種簡單、快速有效的核酸純化方法。盡管該方法純化的核酸純度不是很高，但是研究人員巧妙地將對核酸樣本純度要求低的環(huán)介導(dǎo)的等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）技術(shù)引入微流控，使該體系特異性高，無交叉反應(yīng)，在多種條件下具有良好的穩(wěn)定性，半定量結(jié)果與qPCR相似，具有良好的檢測性能。此外，從核酸提取到離心操作，再到實(shí)時(shí)檢測，整個過程在40分鐘內(nèi)完成，并能夠同時(shí)進(jìn)行40個高通量檢測。由于它的簡單性和可承受性，在資源有限的情況下具有廣泛的潛力提供POCT檢測。

圖2 微流控芯片LAMP方法特異性評估

圖3 微流控芯片LAMP方法的診斷性能

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