自PCR發(fā)展以來(lái)，出現(xiàn)了多種不同的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)與PCR技術(shù)相比，無(wú)需多個(gè)溫度循環(huán)，減少了對(duì)加熱元件的要求，硬件結(jié)構(gòu)更簡(jiǎn)單，易于攜帶核酸檢測(cè)。當(dāng)前，微流體芯片等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)主要有環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)(RPA)和解旋酶擴(kuò)增技術(shù)(HDA)、本文介紹了一種基于核酸序列(NASBA)、鏈置換擴(kuò)增技術(shù)(SDA)、滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)(RCA)等技術(shù)。

近年來(lái)，許多研究者將LAMP與微流控芯片相結(jié)合，不僅保留了LAMP技術(shù)靈敏、準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，而且還能實(shí)現(xiàn)單基因或多基因檢測(cè)，減少試劑用量和誤檢率。以離心微流控芯片為基礎(chǔ)，結(jié)合LAMP技術(shù)和橫流條色度檢測(cè)平臺(tái)，可以同時(shí)檢測(cè)兩種食源性病原體。

以LAMP技術(shù)為基礎(chǔ)，設(shè)計(jì)了一種微流體控制的等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)平臺(tái)，利用光學(xué)傳感器對(duì)LAMP副產(chǎn)物的濁度進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)PMMA材料更適合生產(chǎn)LAMP反應(yīng)容器。Hataoka等將LAMP技術(shù)與電泳技術(shù)結(jié)合在一塊PMMA材料的微流控芯片上，通過(guò)觀(guān)察微流控芯片上的電泳圖，實(shí)現(xiàn)了高靈敏度、高效性、快速性。

Fang等利用LAMP技術(shù)，研制了一種類(lèi)似章魚(yú)的微流控制芯片，能高效快速地檢測(cè)三種甲型流感病毒，并能識(shí)別三種甲型流感病毒亞型。結(jié)果表明，這種方法與PCR方法相比，可節(jié)省成本和時(shí)間，靈敏度和特異性都更高，有較好的分析性能。

Huang等人已研制出用于DNA等溫?cái)U(kuò)增的微流控芯片和實(shí)時(shí)光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)，能夠進(jìn)行特異的分子識(shí)別，發(fā)現(xiàn)DNA擴(kuò)增的指數(shù)特征更為明顯，反應(yīng)時(shí)間縮短，靈敏度提高。但目前大部分由高分子材料制成的微流控芯片設(shè)備往往需要泵送系統(tǒng)或閥來(lái)處理微流體，這增加了系統(tǒng)的成本，操作復(fù)雜，在食品檢測(cè)中應(yīng)用較少。目前LAMP擴(kuò)增檢測(cè)方法主要有熒光法、手機(jī)色譜法、電化學(xué)法、氫離子傳感器法、電導(dǎo)率法等。所以等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)與PCR技術(shù)相比，無(wú)需快速加熱和冷卻機(jī)制，僅需加熱模塊即可擴(kuò)展，與微流體技術(shù)的結(jié)合更為簡(jiǎn)便。

簡(jiǎn)單地說(shuō)，微流控芯片是實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的潛在解決手段，尤其是微流控芯片與LAMP技術(shù)相結(jié)合，可以提高檢測(cè)技術(shù)的分析性能，通過(guò)增加探測(cè)流量，消除儀器設(shè)備不足所帶來(lái)的局限性，在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中有著廣闊的應(yīng)用前景和極具潛力的應(yīng)用價(jià)值。幫助開(kāi)發(fā)便攜設(shè)備進(jìn)行食品分析。